干法装柱和湿法装柱的优缺点
干法装柱和湿法装柱各有其优缺点:
干法装柱
优点:
1. 速度快: 干法装柱通常比湿法装柱更快,因为不需要使用溶剂。
2. 样品层平整: 干法装柱可以保证样品层较完整,避免因溶剂引起的样品层变形。
缺点:
1. 产生气泡: 在“走柱子”过程中,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热,容易产生气泡,尤其在低沸点溶剂如乙醚、二氯甲烷中更为明显。
2. 负载量小: 硅胶内部的孔径是干的,不能充分利用内部表面积,因此负载量相对较小。
3. 硅胶上柱发热: 细硅胶上柱时容易发热,这可能影响分离效果。
湿法装柱
优点:
1. 柱子结实: 湿法装柱的柱子通常装得比较结实,没有气泡,分离效果较好。
2. 充分利用表面积: 硅胶内部的孔径是湿的,可以充分利用内部表面积,因此负载量较大,节省材料。
缺点:
1. 装柱速度慢: 相比干法装柱,湿法装柱的速度较慢。
2. 硅胶高度影响: 硅胶(固定相)的上表面平整度和高度对装柱效果影响较大,且硅胶高度通常为15cm左右,太短或太长都可能影响分离效果。
3. 操作复杂: 湿法装柱需要使用溶剂,操作相对复杂,且需要更多的溶剂。
选择干法还是湿法装柱,取决于具体的应用场景和实验要求。干法装柱适合快速操作和对样品层平整度要求较高的场合,而湿法装柱则在追求柱子结实和分离效果方面更胜一筹。
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